學(xué)習(xí)目標(biāo)
。1)了解培養(yǎng)基中各成分的作用。
。2)了解培養(yǎng)基母液的作用,明確母液配制的目的和意義
。3)能按照配方獨立進(jìn)行各類培養(yǎng)基母液的配制與保存。
任務(wù)要求
由教師提出任務(wù),師生共同探究培養(yǎng)基配方各類成分的特點以及作用,然后根據(jù)生產(chǎn)實際制訂培養(yǎng)基母液配制計劃,并在教師指導(dǎo)下各小組分工來完成各種母液的配制任務(wù)。
一、任務(wù)提出
。ǔS玫呐囵B(yǎng)基有哪些?
。2)一個完善的培養(yǎng)基配方的成分有哪些?各有何作用?
。3)各種成分如何添加到培養(yǎng)基中?
。4)為什么要配制母液?
。5)各種母液是如何配制的?
二 、任務(wù)分析
植物組織培養(yǎng)所選用的培養(yǎng)基有幾十種,而每種又包括多種成分,可以根據(jù)不同的需要來選擇不同的培養(yǎng)基。在這些培養(yǎng)基中有些成分的用量非常微小,如果每次配制培養(yǎng)基時都即時稱量,不僅費時費工,也不夠準(zhǔn)確,因此可以根據(jù)配方特點預(yù)先配制成母液.每液在配制的過程中,可以根據(jù)每種元素的化學(xué)性質(zhì)、用量等來進(jìn)行區(qū)分,配制成不同的母液:
三、相關(guān)知識
在植物組織培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基的配制是一項最基本的工作。配制每種培養(yǎng)基需要十丿L種化合物,配制起來十分不方便,特別是微量元素和梢物生長激素的用量極少,很難達(dá)到精確稱量·因此,可將配方中的各種元素按照一定的方式,配成一些濃縮液,用時稀釋,這種濃縮液就是濃縮儲備液(簡稱母液母液不僅可以解決上述問題,而且還可以減少工作量,使用起來非常方便,提高了工作效率,同時也提高了實驗的精度·
。ㄒ唬└鞣N母液的配制
1,MS培養(yǎng)基母液的配制
在配置母液過程中,應(yīng)先用量量取700~800mL的蒸慵水,放人1000mL的容量瓶中,然后分別稱取每種藥品,分別溶解。大量元素在配制的過程,要注意一定要按照表3.·1給定的排列順序依次混合定容,以免發(fā)生沉淀·鐵鹽母液在配制過程中,要把硫酸&h(FeSO.·7H區(qū)))和乙二胺四乙酸二鈉(Na疒EDTA)分別溶解·然后將乙二胺四乙酸、鈉溶液緩慢倒人硫酸亞鐵(FeS()4·7H》0)溶液中,加熱溶解10min左右,通過加熱形成穩(wěn)定的螯合鐵,性質(zhì)比較0定,不易產(chǎn)生沉淀.在配制微量元素母液和有機物母液時也應(yīng)分別稱重和溶解,對順序要求不是很嚴(yán)格,一般不會出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象·