植物組織培養(yǎng)是一項(xiàng)技術(shù)性很強(qiáng)的工作。為保障植物組織培養(yǎng)工作的順利進(jìn)行,要求實(shí)驗(yàn)室具備基本的一套組培設(shè)備,要求工作人員能夠熟練的掌握組培技術(shù)及操作各種儀器設(shè)備。一個(gè)組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的面積大小和裝備程度取決于兩個(gè)因素:一是所要進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)的性質(zhì);二是所能得到的經(jīng)費(fèi)的多少。而這兩種因素在一起便能決定于一套組培設(shè)備多少錢?
組培實(shí)驗(yàn)室的基本配置設(shè)備有哪些?
。ㄒ唬┏R(guī)設(shè)備
1、天平
組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室需要2-3臺(tái)不同精度的天平。
感量0.001g的天平(分析天平)和感量0.0001g的天平(電子天平)用于稱量微量元素和一些較高度的實(shí)驗(yàn)用品。
感量0.01g和0.1g的天平,用于大量元素母液配制和一些用量較大的藥品的稱量。
2、冰箱
各種維生素和激素類藥品以及培養(yǎng)基母液均需低溫報(bào)存,某些試驗(yàn)還需植物材料進(jìn)行低溫處理,一般普通冰箱即可。
3、酸度計(jì)
用于測定培養(yǎng)基及其它溶液的pH,一般要求可測定pH范圍1-14之間,精度0.01即可。
4、離心機(jī)
用于細(xì)胞、原生質(zhì)體等活細(xì)胞分離,亦用于培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞器、核酸以及蛋白質(zhì)的分離提取。根據(jù)分離物質(zhì)不同配置不同類型的離心機(jī)。
細(xì)胞、原生質(zhì)體等活細(xì)胞的分離用低速離心機(jī);核酸、蛋白質(zhì)分離用高速冷凍離心機(jī);規(guī)模化生產(chǎn)次生產(chǎn)物,還需選擇大型離心分離系統(tǒng)。
5、加熱器
用于培養(yǎng)基的配制。研究性實(shí)驗(yàn)室一般選用帶磁力攪拌功能的加熱器,規(guī);笮蛯(shí)驗(yàn)室用大功率加熱和電動(dòng)攪拌系統(tǒng)。
6、其它
純水器、分裝設(shè)備
。ǘ缇O(shè)備
維持相對得無菌環(huán)境是組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的基本要求。
1、高壓滅菌鍋
用于培養(yǎng)基、玻璃器皿以及其它可高溫滅菌用品的滅菌,根據(jù)規(guī)模大小有手提式、立式、臥式等不同規(guī)格。
2、干熱消毒柜
用于金屬工具如鑷子、剪刀、解剖刀,以及玻璃器皿的滅菌。一般選用200℃左右的普通或遠(yuǎn)紅外消毒柜。
3、過濾滅菌器
用于一些酶制劑、激素以及某些維生素等不能高壓滅菌試劑的滅菌,主要有真空抽濾式和注射器式。4、紫外燈
方便經(jīng)濟(jì)的控制無菌環(huán)境的裝置,緩沖間、接種室和培養(yǎng)室必備。
(三)無菌操作設(shè)備
1、接種箱
是使用較早的簡單的無菌裝置,主體為玻璃箱罩、入口有袖罩,內(nèi)裝紫外燈和日光燈,使用時(shí)對無菌室要求較高。
2、凈化工作臺(tái)
其操作臺(tái)面是半開放區(qū),具方便、操作舒適優(yōu)點(diǎn),通過過濾的空氣連續(xù)不斷吹出,大于0.03um直徑的微生物很難在工作臺(tái)的操作空間停留,保持了較好的無菌環(huán)境。由于過濾器吸附微生物,使用一段時(shí)間后過濾網(wǎng)易堵塞,因此應(yīng)定期更換。
。ㄋ模┡囵B(yǎng)設(shè)備
培養(yǎng)設(shè)備是指根據(jù)需要所選用的不同規(guī)格和控制精度的用于植物細(xì)胞、組織和器官培養(yǎng)的設(shè)施和設(shè)備。
1、培養(yǎng)架
目前所有植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室植株繁殖培養(yǎng)的通用設(shè)施。成本低、設(shè)計(jì)靈活、可充分利用培養(yǎng)空間,以操作方便、大限度利用培養(yǎng)空間為原則。一般有4-5層,層間間隔40-50cm,光照強(qiáng)度可根據(jù)培養(yǎng)植物特性來確定,一般每架上配備2-4盞日光燈。
2、培養(yǎng)箱
細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)等要求培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn),可用光照培養(yǎng)箱、CO2培養(yǎng)箱、濕度控制培養(yǎng)箱等培養(yǎng)。
3、搖床
進(jìn)行液體培養(yǎng)時(shí),為改善通氣狀況,可用振蕩培養(yǎng)箱或搖床。
4、生物反應(yīng)器
進(jìn)行植物細(xì)胞生產(chǎn)次生產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn)室,還需生物反應(yīng)器。
為此至少需要有兩個(gè)隔開的房間:一間用于玻璃器皿的清洗和貯存,以及培養(yǎng)基的制備,第二間用于放置培養(yǎng)物。培養(yǎng)室內(nèi)應(yīng)放一張桌子,上置體視顯微鏡和所需的光源,以便對培養(yǎng)物進(jìn)行鏡檢。取決于本單位的條件,超凈工作臺(tái)可置于培養(yǎng)室中,也可置于一個(gè)普通研究實(shí)驗(yàn)室內(nèi)僻靜的一角,當(dāng)然好是置于一個(gè)專門設(shè)計(jì)的無菌操作室內(nèi)。此外,還需要有一間溫室,以供試管苗移栽之需,這一般可與其它實(shí)驗(yàn)室共用。